吖啶酯（NSP-SA-NHS）Cas199293-83-9及其相關(guān)化合物已被證明是非常有優(yōu)勢的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物，其穩(wěn)定性、活性和敏感性超過了某些放射性同位素。吖啶酯能與含有一級氨基的蛋白發(fā)生反應(yīng)。在堿性條件下，NHS作為離去基團(tuán)被取代，蛋白質(zhì)與吖啶酯形成穩(wěn)定的酰胺鍵。反應(yīng)完成后，多余的吖啶鹽通過脫鹽柱除去。
在存在堿性過氧化氫時(shí)，吖啶標(biāo)記的蛋白不需要酶催化可自行發(fā)光。具體發(fā)光原理是在堿性過氧化氫溶液中，吖啶酯受到過氧化氫離子的進(jìn)攻，生成一個(gè)有張力的不穩(wěn)定的二氧乙烷，進(jìn)一步分解成CO2和電子激發(fā)態(tài)的吖啶酮，當(dāng)吖啶酮回到基態(tài)時(shí)發(fā)出最大吸收波長430nm的光子。
這個(gè)發(fā)光過程是十分短暫（整個(gè)過程的發(fā)生小于2秒），觸發(fā)方案必須增加內(nèi)部光度計(jì)和光子探測器；另外，也可以使用配備自動進(jìn)樣器的多功能酶標(biāo)儀進(jìn)行發(fā)光數(shù)據(jù)采集。蛋白質(zhì)，多肽，抗體，核酸都可以用本產(chǎn)品進(jìn)行標(biāo)記。吖啶酯在堿性過氧化氫的激發(fā)下快速發(fā)光，因此通過收集光子可以檢測到標(biāo)記化合物。
主要用于：化學(xué)發(fā)光及免疫分析、受體分析、核酸及多肽檢測等研究。
儲存條件： ﹣20℃，避光
運(yùn)輸條件： 2-8℃，避光
1.配制說明
標(biāo)記緩沖液：0.2M NaHCO3 (pH=9.0)；
標(biāo)記終止緩沖液： 10% 賴氨酸 0.2M NaHCO3 (pH=9.0)溶液；
脫鹽純化緩沖液：0.1M Na2HPO4-NaH2PO4 (pH=6.5)；
吖啶酯發(fā)光液：(0.01~0.1M) NaOH+0.05% H2O2 。
2. 計(jì)算標(biāo)記所用抗體（蛋白質(zhì)）和吖啶酯的量：
通常設(shè)定摩爾比n(抗體): n(吖啶酯)=1:10~1:50，具體需根據(jù)氨基酸組分進(jìn)行摸索調(diào)整；
配制2.5mg/ml 吖啶酯-DMSO母液，注意玻璃器皿盛放并避光；
使用0.2M NaHCO3（pH=9.0） 溶液配制0.1~0.5 mg/ml 抗體反應(yīng)液 。
需要注意的是，吖啶酯標(biāo)記的蛋白可以在酸性緩沖液中4℃避光存儲（注意補(bǔ)加疊氮鈉等防腐劑），如果儲存效果不佳，則請避光保存于-20℃或者-80℃。德晟專業(yè)生產(chǎn)化學(xué)發(fā)光試劑、化學(xué)發(fā)光底物和酶的顯色底物以及體外診斷試劑。我們還可以接受定制合成服務(wù)，歡迎前來咨詢訂購！