血液分析是動(dòng)物健康和福利控制中非常重要和強(qiáng)大的診斷工具。它通常在高等脊椎動(dòng)物中進(jìn)行,其參考值已經(jīng)確立,但魚類血液學(xué)仍需要進(jìn)一步研究。許多內(nèi)在和環(huán)境因素對(duì)魚的血液學(xué)值有深遠(yuǎn)的影響,使參考值的確定變得困難。此外,由于凝血時(shí)間短,魚血通常需要添加抗凝劑。抗凝劑的選擇對(duì)于獲得可靠的血液檢測(cè)值至關(guān)重要。在本研究中,兩種常見(jiàn)的抗凝劑的影響,K 2 EDTA(1.8毫克/毫升)和肝素鋰(18國(guó)際單位/毫升),在養(yǎng)殖的斑鱒血液學(xué)值褐鱒對(duì)產(chǎn)卵季節(jié)的產(chǎn)卵者進(jìn)行了調(diào)查。
基本血液學(xué)分析的結(jié)果,例如壓實(shí)細(xì)胞體積 (PCV)、血紅蛋白濃度 (HGB)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù) (RBC)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白 (MCH)、平均紅細(xì)胞體積 (MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度 (MCHC)和白細(xì)胞計(jì)數(shù) (WBC),在K 2 EDTA和肝素鋰之間進(jìn)行了比較。在 PCV、MCV 和 MCHC 中觀察到統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著差異,而 HGB、RBC、MCH 和 WBC 沒(méi)有顯示出這種差異。這些結(jié)果表明肝素鋰提供了更可靠的結(jié)果,因?yàn)?/span> K 2 EDTA 處理的樣品中的紅細(xì)胞有膨脹的趨勢(shì)。
乙二胺四乙酸 (EDTA) 的鹽類被國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì) (ICSH) 和臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)研究所 (CLSI) 推薦為血細(xì)胞計(jì)數(shù)的首選抗凝劑 。EDTA 作為 Ca 2+和 Mg 2+離子的螯合劑。它結(jié)合鈣,對(duì)于凝血級(jí)聯(lián)中的酶促反應(yīng)必不可少,從而產(chǎn)生抗凝作用,對(duì)細(xì)胞形態(tài)的影響最小。EDTA 可以最可靠地保存染色血膜上的細(xì)胞,它常用于人類、哺乳動(dòng)物和其他脊椎動(dòng)物的常規(guī)血液學(xué)測(cè)試。它還在魚類中取得了一些成功 。然而,EDTA 鹽有一些缺點(diǎn)。在某些情況下,它們會(huì)導(dǎo)致血液溶血,尤其是在用未緩沖的三卡因甲磺酸鹽 (MS 222) 麻醉的標(biāo)本中。
肝素鹽主要用于臨床生物化學(xué)。它阻止凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶(因子 II),從而抑制纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白。根據(jù)一些爬行動(dòng)物和鳥類的 EDTA 保存的血液樣本中溶血的報(bào)道很少,建議在對(duì)有紅細(xì)胞的動(dòng)物進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)使用肝素。出于這個(gè)原因,許多作者使用肝素作為魚類血液學(xué)中首選的抗凝劑。然而,肝素并不能完全阻止白細(xì)胞和血小板聚集,這會(huì)導(dǎo)致樣本凝固,并且還會(huì)產(chǎn)生 Wright 染色的血涂片的藍(lán)色背景染色。另外它也比其他抗凝劑更昂貴。
一些研究者觀察到從 EDTA 和肝素鹽中獲得的 HGB 和 RBC 存在顯著差異,肝素鋰比乙二胺四乙酸二鉀更適合用于養(yǎng)殖鱒魚產(chǎn)卵的血液學(xué)評(píng)估。肝素不會(huì)影響紅細(xì)胞的大小,從而將溶血的可能性降至最低,與肝素相比,用EDTA處理的血液制成的血液涂片質(zhì)量更高。根據(jù)目前的研究,我們建議K2EDTA可以謹(jǐn)慎地用于血細(xì)胞計(jì)數(shù)和HGB的測(cè)定。為了更好地了解抗凝劑對(duì)血液學(xué)參數(shù)的影響,還需要進(jìn)一步的研究。